脱氧核糖核酸酶 I 来源于牛胰腺

3.1.21.1 ( BRENDA | IUBMB )

232-667-0

MFCD00130918

NA.54

DNAse I可用于切开DNA，作为将标记碱基插入DNA的第一步。来自sigma的该酶已用于处理大鼠的脑组织。该研究表明星形胶质细胞的轴突生长不受少突胶质细胞抑制。在另一项研究中，大肠杆菌的解冻固定样本被来自Sigma的DNAseI以及其他酶进行消化。消化是在进行通透化处理和核酸染色前完成的。
来自牛胰腺的脱氧核糖核酸酶I已用于研究枯草芽孢杆菌中核酸酶的二维酶谱分析。来自牛胰腺的脱氧核糖核酸酶I还用于研究小沟和大沟结合药物和嵌入剂对小沟结合蛋白RecA和脱氧核糖核酸酶I的DNA结合的影响。
用于从蛋白质样品中除去 DNA。

DNase I是一种内切核酸酶，可作用于与嘧啶相邻的磷酸二酯键以产生具有末端5′-磷酸的聚核苷酸。当Mg²⁺存在时，DNAse I可独立切割DNA的每条链且切割位点是随机的。当Mn²⁺存在时，两条DNA链都几乎是在同样的位置被切割。最适pH在7-8之间。二价阳离子如Mn²⁺, Ca²⁺, Co²⁺以及Zn²⁺都是酶的激活剂。5 mM浓度的Ca²⁺可稳定酶免收蛋白水解酶的消化。来自牛胰腺的DNAse I由四种色谱可区分的组分A，B，C和D组成，它们的摩尔比为4:1:1。仅有少量的D被发现。2-巯基乙醇、螯合剂、十二烷基硫酸钠(SDS)和肌动蛋白都已知可抑制酶的活性。

一Kunitz单位的酶在以I型或III型DNA作为底物时，在 pH 5.0，37℃的条件下在每mL中每分钟可引起0.001的A₂₆₀。

含氯化钙的冻干粉

溶液0.15 M NaCl的10 mg/mL DNAse I溶液分装保存在−20 ℃一周后可能会丢失<10%的活性。同样的溶液保存在2-8 ℃则可能丢失约20%的活性。当在pH 5和7之间时，它可在60 ℃维持活性最长达五小时，并在68 ℃ <10分钟内丢失活性。它在乙酸缓冲液(pH 5.0)和tris缓冲液((pH 7.2)，1 mg/mL浓度)中以6%/小时的速率丢失活性。

蛋白由双缩脲法测定。

300

Type IV

lyophilized powder

≥2,000 Kunitz units/mg protein

~31 kDa

chromatography

Protein, ≥80%

0.15 M NaCl: soluble 5.0 mg/mL, clear, colorless

diagnostic assay manufacturing
diagnostic assay manufacturing

Chymotrypsin ≤0.5%
Protease ≤0.05%
RNase ≤0.02%

wet ice

−20℃

15000 units in glass bottle
150000, 375000, 750000 units in poly bottle

13 - Non Combustible Solids

WGK 3