脱氧核糖核酸酶 I 来源于牛胰腺

3.1.21.1 ( BRENDA | IUBMB )

232-667-0

MFCD00130918

NA.54

已有研究采用牛胰腺脱氧核糖核酸酶I，研究了从牛胰腺中提取高活性RNase、DNase、胆固醇酯酶和胰蛋白酶的一个新途径。牛胰腺脱氧核糖核酸酶I也被用于研究鲤鱼肝脏DNase的分离和进一步的特性。
Sigma公司的DNAse I与人类尿液来源的白细胞介素1抑制剂相比，具有水解[¹⁴C]DNA [¹⁴C]的能力。它也被用来切割139个碱基对Hind III/Nci I限制性片段，以研究该酶用于足迹实验的稳定性。DNase I被广泛用作研究药物和蛋白质与DNA结合的印迹剂。
用于从蛋白质样品中除去 DNA。

DNase I是一种核酸内切酶，作用于嘧啶附近的磷酸二酯键，产生末端为5-磷酸的多核苷酸。在Mg²⁺存在时，DNAse I对每条DNA链进行独立的裂解，裂解位点是随机的。在Mn²⁺存在下，两条DNA链几乎在同一位点被裂解。其最佳pH值在7到8之间。二价阳离子，如Mn²⁺、Ca2+^{、Co2+和Zn2+是该酶的激活剂。浓度为5mM的Ca2+ 可以稳定酶的蛋白水解消化。牛胰腺DNA酶I由A、B、C、D四种色谱可分辨组分组成，摩尔比分别为4:1:1。仅发现少量的D。2-巯基乙醇、螯合剂、十二烷基硫酸钠(SDS) 和肌动蛋白 是已知的抑制该酶活性的物质。}

以I型或III型DNA作为底物时，在pH 5.0、37℃条件下，一单位Kunitz 每分钟可生成0.001/mL的ΔA₂₆₀。(1单位 = 1 Kunitz单位)

含氯化钙的冻干粉

该酶粉可在pH值为4.0-9.0的水中或任何缓冲液中进行复溶，磷酸盐缓冲液除外。应避免钙螯合剂的存在。在0.15 M NaCl中加入10 mg/mL DNAse I溶液，在 −20℃的温度下保存一周，其活性可能会降低10%。同样的溶液分装储存在2-8℃中，其活性可降低约20%。它在60℃下，pH值5到7之间可保持活性长达5小时，在68℃时在<10分钟内失去活性。在醋酸盐缓冲液(pH 5.0)和tris缓冲液(pH 7.2)中，当浓度为1mg/mL时，其活性以6%/小时的速度丧失。

双缩脲法测定蛋白质。

300

sterile-filtered

Type II-S

lyophilized powder

≥2,000 units/mg protein

~31 kDa

chromatography

Protein, ≥80%

vial of ≥10.0 mg protein

endotoxin, tested

0.15 M NaCl: soluble 5.0 mg/mL, clear(lit.)

diagnostic assay manufacturing
diagnostic assay manufacturing

Chymotrypsin ≤0.01%
Protease ≤0.005%
RNase ≤0.01%

−20℃

GHS08

Danger

H334

P261 - P284 - P501

Resp. Sens. 1

11 - Combustible Solids

WGK 3

Eyeshields, Gloves, type N95 (US)