ImmunoProbe^TM 生物素化试剂盒

34058011

NA.32

对于定制的蛋白质生物素化，Sigma 提供了两种不同规格的结合试剂盒。该生物素-抗生物素蛋白系统具有灵敏度高、特异性强的特点。生物素可以与抗体、凝集素、酶和其他蛋白质结合。试剂盒中的实验方案已针对抗体进行了优化。抗生物素蛋白结合生物素亲和力高(K_a = 10¹⁵ M))、特异性强。当生物素蛋白与酶或荧光染料结合后，可通过酶促反应将底物底物转化为形成可见产物，或通过分光光度法或流式细胞术检测荧光来鉴定生物素化化合物。

ImmunoProbe^™生物素化试剂盒用于制备生物素标记抗体。
生物素经氨基己酸修饰，然后通过与磺基-N-羟基琥珀酰亚胺(BAC-Sulfo-NHS)的一个酯键结合活化。氨基己酸提供一个六碳间隔，可减少生物素的空间位阻，并改善抗生物素蛋白结合位点的可及性。羟基琥珀酰亚胺的磺化增加了试剂的极性，使其易溶于水性缓冲液。该酯提供了一个与不稳定酯键相邻的羰基碳，作为可接近赖氨酸残基的伯胺侧链的靶标，通过酰胺键连接生物素酰胺己酸与蛋白质。

• 完整的标记和分析方案
• BAC-Sulfo-NHS 完全溶于水
• 不需要 DMF 或 DMSO
• 在中性 pH 和生理离子强度下实现生物素化，无需使用严苛条件，避免了损伤敏感的蛋白
• 使用凝胶过滤快速分离结合物与反应物
• 结合物中的生物素与蛋白质(对于抗体)的摩尔比为 2 至 5

• 两种规格可供选择：
每次反应 1mg 蛋白质(B-TAG)
每次反应 10mg 蛋白质(BK-101)
• 试剂足够进行 5 次标记

步骤：
通过 4 个简单的步骤进行结合：
1.用磷酸盐缓冲液(PB)重悬 BAC-Sulfo-NHS。
2.将 BAC-Sulfo-NHS 加入蛋白质中，在室温下反应 30 分钟。
3.通过凝胶色谱法将结合物与反应物分离。
4.通过抗生物素蛋白-HABA 测定(仅 BK-101)测定用于生物素标记的结合物。结合物随时可用。

ImmunoProbe is a trademark of sigma-aldrich Co. LLC

组份可单独销售
P3813 0.01 M PBS, pH 7.4, powder 1 L
H5126 4′-Hydroxyazobenzene-2-carboxylic acid (HABA) 1 mL/vial

200

2-8℃

试剂盒包括生物素化和测定生物素/蛋白质摩尔比所需的全部试剂。

GHS07,GHS08

Danger

H315 - H319 - H334 - H335

P261 - P264 - P271 - P280 - P302 + P352 - P305 + P351 + P338

Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3

Respiratory system

10 - Combustible liquids

WGK 3