过氧化物酶 来源于辣根

1.11.1.7 ( BRENDA | IUBMB )

232-668-6

MFCD00071339

32160410

NA.54

辣根过氧化物酶是从辣根(Amoracia rusticana)中分离出来的，属于过氧化物酶的铁原卟啉基团。HRP是含有四个二硫键的单链多肽。它是一种含有18%碳水化合物的糖蛋白。碳水化合物由半乳糖、阿拉伯糖、木糖、岩藻糖、甘露糖、甘露糖胺和半乳糖胺组成，具体取决于特定同工酶。其分子量(约44 kDa)包括多肽链(33,890道尔顿)、氯化血红素加Ca²⁺ (约700道尔顿)和碳水化合物(约9,400道尔顿)。至少存在7种HRP同工酶。 辣根过氧化物酶同工酶的等电点范围为3.0-9.0。

辣根过氧化物酶已用于：

• 粪便淀粉分析
• 通过Trinder法测定血浆葡萄糖水平
• 孵育阿魏酰基阿拉伯糖基木聚糖组分并评估氧化偶联
• 检测糖蛋白

HRP易与过氧化氢(H₂O₂)结合，所得[HRP-H₂O₂]配合物可氧化各种氢供体。最佳pH为6.0-6.5，酶在5.0-9.0的pH范围内最稳定。HRP可以通过几种不同的方法与抗体缀合，包括戊二醛、高碘酸盐氧化、通过二硫键以及通过氨基和巯基定向交联剂。它比酶标签β-半乳糖苷酶和碱性磷酸酶更小、更稳定。因此，它是最理想的标签。而且，糖基化使其非特异性结合较低。它还用于测定溶液中的葡萄糖 和过氧化物 。已知叠氮化钠、氰化物、L-胱氨酸、重铬酸盐、亚乙基硫脲、羟胺、硫化物、钒酸盐、对氨基苯甲酸和Cd²⁺、Co²⁺、Cu²⁺、Fe³⁺、Mn²⁺、Ni²⁺、Pb²⁺离子可抑制酶活性。
当与底物一起孵育时，辣根过氧化物酶可产生标记分子的有色荧光或发光衍生物，从而进行定量。

一个连苯三酚单元将在20℃、pH 6.0条件下，在20秒内从连苯三酚形成1.0mg的红棓酚。

RZ(Reinheitszahl)是指溶于去离子水中的酶(0.5–1.0 mg/ml)的吸光度比值A₄₀₃/A₂₇₅ 。 它是血红素含量的量度，而不是酶活性。 即使是RZ值较高的制剂也可能具有较低的酶活性。

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200

Type I

essentially salt-free, lyophilized powder

≥50 units/mg solid (using pyrogallol)

~44 kDa

0.1 M phosphate buffer: soluble (pH 6.0)
H₂O: soluble

RZ ≥1.0

2-8℃

5000, 25000, 50000, 100000, 200000 units in glass bottle

GHS08

Danger

H317 - H334

P261 - P272 - P280 - P284 - P302 + P352 - P333 + P313

Resp. Sens. 1 - Skin Sens. 1

11 - Combustible Solids

WGK 3

Eyeshields, Gloves, type N95 (US)