过氧化物酶 来源于辣根

1.11.1.7 ( BRENDA | IUBMB )

232-668-6

MFCD00071339

NA.54

辣根过氧化物酶是从辣根(Amoracia rusticana)中分离出来的，属于过氧化物酶的铁原卟啉基团。HRP是含有四个二硫键的单链多肽。它是一种含有18%碳水化合物的糖蛋白。碳水化合物由半乳糖、阿拉伯糖、木糖、岩藻糖、甘露糖、甘露糖胺和半乳糖胺组成，具体取决于特定同工酶。其分子量(约44 kDa)包括多肽链(33,890道尔顿)、氯化血红素加Ca²⁺ (约700道尔顿)和碳水化合物(约9,400道尔顿)。至少存在7种HRP同工酶。 辣根过氧化物酶同工酶的等电点范围为3.0-9.0。
HRP 是含有四个二硫键的单链多肽。它是一种含有 18％ 碳水化合物的糖蛋白。该碳水化合物由半乳糖、阿拉伯糖、木糖、岩藻糖、甘露糖、甘露糖胺和半乳糖胺组成，具体取决于特定同工酶。其分子量(约 44kDa)包括多肽链(33,890 道尔顿)、氯化血红素(加 Ca²⁺)(约 700 道尔顿)和碳水化合物(约 9,400 道尔顿)。存在至少 7 种 HRP 同工酶。辣根过氧化物酶同工酶的等电点范围为 3.0-9.0。

该酶长期用于通过使用荧光分光光度法测定烟草 BY-2 细胞中的 H₂O₂ 产生。
辣根过氧化物酶(HRP)由辣根(Amoracia rusticana)中分离并属于过氧化物酶的铁卟啉基团，适合蛋白质印迹、ELISA 和免疫组化等生化应用。其作用是扩增弱信号并提高靶标分子(例如蛋白质)的可检测性。产品 P8415，XII型，是一种基本不含盐的冻干粉。也是产品 P8375 的进一步纯化的产物，常用于测定溶液中葡萄糖和过氧化物的量。长期用于烟曲霉快速敏感性分析。
来自辣根的过氧化物酶已被用于引发过氧化物酶偶联测定。它还被用于制备β-半乳糖苷酶(β-gal)储备溶液。

当与底物一起孵育时，辣根过氧化物酶可产生标记分子的有色、荧光或发光衍生物，从而实现定量检测。研究表明，辣根过氧化物酶可以略微降低 cydAB 突变体中的抑制水平。已知的抑制剂有叠氮化钠、氰化物、L-胱氨酸、重铬酸盐、亚乙基硫脲、羟胺、硫化物、钒酸盐、对氨基苯甲酸，以及 Cd²⁺、Co²⁺、Cu²⁺、Fe³⁺、Mn²⁺、Ni²⁺ 和 Pb²⁺ 离子。
HRP 易与过氧化氢(H₂O₂)结合，生成的 [HRP-H₂O₂] 络合物可氧化各种氢供体。该酶的最佳 pH 值为 6.0-6.5，在5.0-9.0 的 pH 值范围内最为稳定。HRP 可以通过几种不同的方法与抗体结合，包括戊二醛、高碘酸盐氧化，通过二硫键，以及通过氨基和硫醇定向交联剂。它比酶标记物和 β-半乳糖苷酶和碱性磷酸酶更小、更稳定，因此是最理想的标记物。此外，它的糖基化导致较低的非特异性结合。它还可用于测定溶液中的葡萄糖和过氧化物。

过氧化物酶 VI(P8375)的进一步纯化产物。
有关 过氧化物酶 的更多信息，请访问 www.sigma-aldrich.com/enzymeexplorer。

一个连苯三酚单元将在20℃、pH 6.0条件下，在20秒内从连苯三酚形成1.0mg的红棓酚。

色谱纯化产品

RZ(Reinheitszahl)是指溶于去离子水中的酶(0.5–1.0 mg/ml)的吸光度比值A₄₀₃/A₂₇₅ 。 它是血红素含量的量度，而不是酶活性。 即使是RZ值较高的制剂也可能具有较低的酶活性。
初步的等电聚焦数据表明这主要是同工酶 C

200

Type XII

essentially salt-free, lyophilized powder

≥250 units/mg solid (using pyrogallol)

~44 kDa

0.1 M phosphate buffer: soluble (pH 6.0)
H₂O: soluble

RZ ≥3.0

2-8℃

500, 1000, 2000, 5000 units in glass bottle

GHS08

Danger

H317 - H334

P261 - P272 - P280 - P284 - P302 + P352 - P333 + P313

Resp. Sens. 1 - Skin Sens. 1

11 - Combustible Solids

WGK 3

Eyeshields, Gloves, type N95 (US)