碱性磷酸酶 来源于牛肠粘膜

3.1.3.1 ( BRENDA | IUBMB )

232-631-4

MFCD00131849

42010105

NA.54

推荐用于抗体和蛋白质缀合的高比活性等级。
该酶已被用于开发一种高灵敏度的免疫测定法，用于测定千分之一的碱性磷酸酶。它不仅被用于胰岛素原的免疫测定，也被用于预处理 ISG(未成熟分泌颗粒)膜，以研究其蛋白质组分的磷酸化。
碱性磷酸酶可用于酪蛋白和其他蛋白质的去磷酸化。碱性磷酸酶还可用于 DNA 或 RNA 的 5′-末端的去磷酸化，以防止自我连接。经碱性磷酸酶的去磷酸化作用后，DNA 或 RNA 还可被放射性标记磷酸盐标记(通过 T4 多核苷酸激酶)。
碱性磷酸酶通常在酶联免疫吸附测定(ELISA)、免疫印迹和免疫组化等免疫学技术中与抗体和其他蛋白偶联。它通常用于蛋白质和核酸去磷酸化，也可用于高灵敏度的蛋白标记。碱性磷酸酶也可用于DNA 或 RNA 的5′-末端去磷酸化，以防止自身连接。用碱性磷酸酶去磷酸化后，也可用放射性标记的磷酸盐(通过 T4 多核苷酸激酶)标记 DNA 或 RNA。产物 P7923 已被用于一种新的产腈水解酶菌株筛选策略 。

该酶对醇类、胺类、焦磷酸盐以及酚类的磷酸酯具有广泛的特异性。常用于蛋白质和核酸的去磷酸化。
这种酶是一种糖蛋白，含约 12% 的碳水化合物(6% 己糖和 6% 其他中性糖)。每个碱性磷酸酶分子含有四个锌原子和四个二硫键。在镁存在的情况下，碱性磷酸酶活性达到最大。它可催化磷酸单酯的水解，例如：对硝基苯基磷酸酯、磷酸苯基酯、磷酸酚酞、α-甘油磷酸盐，β-甘油磷酸、2-磷酸甘油酸、丙糖磷酸、葡萄糖-6-磷酸、葡萄糖 1-磷酸、果糖 1-磷酸、果糖 6-磷酸、腺苷 5-磷酸腺苷 3-磷酸、磷酸烯醇丙酮酸和 β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸等。 砷酸盐、半胱氨酸、碘、无机磷酸盐、焦磷酸盐、磷酸二异丙酯、三苯基磷酸盐、氟磷酸二异丙酯和 L-苯丙氨酸是碱性磷酸酶的一些强抑制剂。
来自牛肠粘膜的碱性磷酸酶在 pH 7.5-9.5 范围内最稳定。该酶对醇、胺、焦磷酸和酚的磷酸酯具有广泛的特异性。它在锌和镁或钙的二价离子存在下才具有活性 。

牛肠碱性磷酸酶为二聚膜衍生糖蛋白。至少存在三种同工酶，每个单体通常拥有两个 N-连接多糖和一个或多个 O-连接多糖。2 该酶需要锌以及镁或钙二价离子才能显示活性。
牛肠道碱性磷酸酶是一种二聚化的膜衍生糖蛋白。其存在至少三种异构体，每个单体通常具有两个N-连接的和一个或多个O-连接的聚糖。

在pH 9.8,37℃条件下，一个DEA单位可每分钟水解1 μmole的4-硝基苯基磷酸酯。(一个甘氨酸单位相当于~3个DEA单位)

50% 甘油溶液，含 5 mM Tris、5 mM MgCl ₂ 和 0.1 mM ZnCl ₂ ，pH值为 7.0

包装规格取决于 DEA 单位
双缩脲法测定蛋白质。

buffered aqueous glycerol solution

200

≥4,000 DEA units/mg protein

dimer ~160 kDa

≥10.0 mg/mL

2-8℃

2000, 10000 units in poly bottle

13 - Non Combustible Solids

WGK 3

Eyeshields, Gloves, type N95 (US)