胰蛋白酶-EDTA溶液 1X

MFCD00130286

NA.75

该产品的典型用途是从培养表面除去粘附细胞。从其基底上分离所需的胰蛋白酶浓度主要依赖于细胞类型和培养基已使用的时间。
1X胰蛋白酶-EDTA溶液已被用于细胞的解离/胰蛋白酶消化。

胰蛋白酶可切割赖氨酸和精氨酸残基的C末端侧的多肽。如果酸性残基位于切割位点的任一侧，则该反应的水解速度会减慢，并且如果脯氨酸残基位于切割位点的羧基侧，则会停止水解。胰蛋白酶活性的最佳pH为7-9。胰蛋白酶还可以起到裂解氨基酸合成衍生物中的酯和酰胺键的作用。将EDTA(乙二胺四乙酸)添加到胰蛋白酶溶液中作为螯合剂，可中和钙和镁离子，从而掩盖胰蛋白酶作用的肽键。去除这些离子会增加酶活性。

丝氨酸蛋白酶抑制剂，包括DFP(二异丙基氟磷酸盐)、TLCK(Na-p-甲苯磺酰基-L-赖氨酸氯甲基酮)、APMSF(4-脒基苯基甲磺酰氟)、AEBSEF(4-(2-氨基甲基)苯磺酰氟)和抑肽酶等，会抑制胰蛋白酶。

胰蛋白酶由223个氨基酸残基的单链多肽组成，其通过从胰蛋白酶原去除N-末端六肽而产生(在Lys-Ile肽键处被切割)。氨基酸序列通过6个二硫键交联。这是胰蛋白酶、β-胰蛋白酶的天然形式。β-胰蛋白酶可以在Lys-Ser残基处发生自裂解，并产生α-胰蛋白酶。胰蛋白酶是丝氨酸蛋白酶家族的成员。

本品应置于-10至-40℃环境冷冻储存。避免反复冻融。

该产品含有酚红。由于在干冰上运输，包装中可能存在大量二氧化碳。这些CO₂ 可以进入溶液并稍微降低pH值，使溶液呈现橙色而不是粉红色。橙色溶液仍然适合使用，或者可以用氢氧化钠调节pH。长时间孵育胰蛋白酶浓度过高的细胞会破坏细胞膜并杀死细胞。需使用不含Ca²⁺ 或Mg²⁺的缓冲盐溶液溶解胰蛋白酶或从浓缩溶液中稀释胰蛋白酶。

0.12% trypsin, 0.02% EDTA, trypsin gamma irradiated by SER-TAIN Process, without phenol red, in Dulbecco′s Phosphate Buffered Saline
for research or for further manufacturing use

400

sterile; γ-irradiated

liquid

tissue dissociation, adherent cell passaging, adherent cells, adherent cell release

dry ice

−20℃

12 - Non Combustible Liquids

WGK 3