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产品别名
Cas9 质粒
Cas9 plasmid
基本信息
| NACRES | NA.51 |
| General description【一般描述】 | Cas9表达质粒使用CMV启动子实现Cas9强瞬时表达。您可以使用MluI和NheI酶切将CMV替换为其它启动子。而且还可使用XbaI酶切将Cas9表达质粒线性化，以实现基于T7的mRNA表达。 |
| Application【应用】 | 功能性基因组学/靶点验证
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| Components【组分】 | 1管含1µg 的Cas9质粒。 请注意，该产品不含向导RNA序列。向导RNA必须通过定制CRISPR产品选项卡单独购买。 |
| Principle【原理】 | CRISPR/Cas是细菌和古细菌的一种防御系统，可用来对抗入侵的病毒和质粒。来自酿脓链球菌的II型CRISPR/Cas系统包含两种分子元件，即一个Cas9蛋白和一个非编码向导RNA(gRNA)，该系统经过基因改造而被用于真核系统中。Cas9核酸内切酶可在单个gRNA的引导下，在指定基因组位置上引入DNA双链断裂(DSB)。与锌指核酸酶(ZFN)诱导的DSB相似，细胞随后会激活内源性DNA修复程序，即非同源性末端接合(NHEJ)或同源重组修复机制(HDR)，对目标DSB进行修复。 |
| Physical form【外形】 | Sigma Cas9 质粒DNA的产品形式是浓度为20ng/μl的50μl溶液。 |
| Preparation Note【制备说明】 | Sigma CRISPR质粒产品为小量提取包装，可能不适用于转染到特殊类型的细胞中。为得到最佳结果，我们建议在转染前使用无内毒素的DNA纯化试剂盒大量提取质粒。 |
| Other Notes【其他说明】 | 为了介导DNA双链断裂，必须与U6-gRNA质粒一起使用。 文献中使用的标准转染浓度范围为≥1.0 ug/μl且≤5 uL的Cas9质粒结合≥1.0 ug/μl且≤5 ul的U6-gRNA质粒。(上述所有浓度均假设是对0.5~1百万个细胞进行核转染) |
| Legal Information【法律信息】 | CRISPR使用授权协议 |
产品性质
| Quality Level【质量水平】 | 200 |
| recombinant【重组】 | expressed in E. coli |
| packaging【包装】 | vial of 50 μL |
| concentration【浓度】 | 20 ng/μL in TE buffer; DNA (1μg of plasmid DNA) |
| Promoter【启动子】 | Promoter name: CMV |
| selection | kanamycin |
| shipped in【运输】 | dry ice |
| storage temp.【储存温度】 | −20℃ |
安全信息
| Storage Class Code【储存分类代码】 | 10 - Combustible liquids |
