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产品性质
| Quality Level【质量水平】 | 200 |
| packaging【包装】 | vial of 50 μL |
| concentration【浓度】 | 500 ng/μL |
| shipped in【运输】 | dry ice |
| storage temp.【储存温度】 | −70℃ |
基本信息
| General description【一般描述】 | 体外转录生成的Cas9 mRNA具有帽子和polyA尾巴结构。该mRNA应该与纯的向导RNA一起使用。使用RNA和质粒构建体，可避免启动子-胚胎兼容性问题以及核酸酶和gRNA表达质粒随机整合到宿主动物基因组的可能性。 |
| Application【应用】 | 功能性基因组学/转基因应用
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| Features and Benefits【特点和优势】 | RNA可立即用于转基因应用。为了介导DNA位点特异性双链断裂，必须与纯的向导RNA序列一起使用。 |
| Components【组分】 | 每管含25ugμg的Cas9 mRNA。 请注意，该产品不含向导RNA序列。向导RNA必须通过定制CRISPR产品选项卡单独购买。 |
| Principle【原理】 | CRISPR/Cas是细菌和古细菌的一种防御系统，可用来对抗入侵的病毒和质粒。来自酿脓链球菌的II型CRISPR/Cas系统包含两种分子元件，即一个Cas9蛋白和一个非编码向导RNA(gRNA)，该系统经过基因改造而被用于真核系统中。Cas9核酸内切酶可在单个gRNA的引导下，在指定基因组位置上引入DNA双链断裂(DSB)。与锌指核酸酶(ZFN)诱导的DSB相似，细胞随后会激活内源性DNA修复程序，即非同源性末端接合(NHEJ)或同源重组修复机制(HDR)，对目标DSB进行修复。 |
| Physical form【外形】 | Sigma Cas9 mRNA的浓度为500 ng/μl(50 μl Cas9 mRNA，具有帽子和polyA尾巴结构) |
| Preparation Note【制备说明】 | 尽管Sigma高质量的RNA合成工艺已成功用于许多基于mRNA的ZFN转基因项目，但是为了确保去除所有可能堵塞显微注射针头的颗粒物，我们仍强烈建议您在进行显微注射前，将最终调整过浓度的CRISPR RNA样品进行离心。 |
| Other Notes【其他说明】 | 为了介导DNA位点特异性双链断裂，必须与纯的向导RNA序列一起使用。 尽管Sigma CRISPR RNA不是针对稳定的细胞培养而开发的，但是，我们已经发现使用RNA形式的CRISPR核酸酶和配对切口酶检测CEL-I活性的一些成功案例。RNA递送系统可能更适用于对双链DNA较敏感的细胞类型(如树突细胞)或启动子与细胞不兼容的情况。 文献中使用的Cas9 mRNA和gRNA标准显微注射浓度范围分别为20-200 ng/μl和10-50 ng/μl。 |
| Legal Information【法律信息】 | CRISPR使用许可协议 |
安全信息
| Storage Class Code【储存分类代码】 | 12 - Non Combustible Liquids |
| WGK | WGK 1 |
