重组DNase I

3.1.21.1 ( BRENDA | IUBMB )

属性：它是一种双链特异性内切核酸酶，需要二价阳离子激发最大活性。
活性：根据Kunitz，每瓶含有10,000U(+ 25℃；DNA作为底物)。
单位定义：一个单位表示在测定条件下导致吸光度以0.001 /min的速率增加的酶活力。
它是一种双链特异性内切核酸酶，需要二价阳离子激发最大活性。

内容物
冻干粉

根据Kunitz，一个酶活力单位表示在测定条件下，在1ml中，导致260nm处的吸光度以0.001 /min的速率增加。体积活性是在0.1M乙酸钠，5mM MgSO₄，pH 5.0条件下进行测定。
检测混合物：将小牛胸腺DNA(100 μg)与20至50U DNase I在+ 25℃下进行孵育。
对260nm处吸光度的增加进行测定。

信息说明：由于Kunitz检测具有高重复性和灵敏度，因此根据Kunitz检测，选择这些条件用于活性测定。当将该酶用于正常实验目的时，罗氏公司建议使用适合特定应用的孵育缓冲液，例如，在标准文献中所提到的缓冲液(Sambrook et al., Curr.Prot.Mol.Biol., etc.)。

激活剂：该酶需要二价阳离子激发最大活性。反应的特异性取决于所用阳离子的性质。在Mg²⁺存在的条件下，DNase I可在dsDNA上造成单链缺口，而在Mn²⁺存在的情况下，该酶可引起双链断裂。
储存条件(工作液)：长期保存溶解酶

通常推荐溶解DNase I的溶剂是水。当DNase I在水中重构时，溶液可在2℃至8 ℃ 下保存2天，在-15℃至-20 ℃ 下保存1个月。为获得最佳效果，请制备适当的等分试样，避免反复冻融。然而，如需长期储存，则请将DNase I小心地溶解于下列缓冲液。在缓冲液1中，酶可稳定保存数周。如果溶解在缓冲液2、3或4中且在建议的温度下储存，则酶将稳定保存至少18个月。

信息说明：溶解时不要对酶进行涡旋混匀！
缓冲液1：20mM Tris-HCl、20mM MgCl₂、5mM CaCl₂、0.1mM二硫赤藓糖醇、0.1mM EDTA、50% (v/v)甘油，pH 8。此溶液储存在-15℃至-25℃条件下，不会冻结，且可稳定保存数周。
缓冲液2：20mM Tris-HCl、50mM NaCl、1mM二硫赤藓糖醇、100μg/mL BSA、50% 甘油(v / v)，pH 7.6。此溶液可在-15℃至-25℃条件下最长储存18个月，且不会冻结。
缓冲液3：20mM Tris-HCl、1mM MgCl₂、50% (w/v)甘油，pH 7.5。此溶液可在-15℃至-25℃条件下最长储存18个月，且不会冻结。
缓冲液4：20mM Tris-HCl、1mM MgCl₂，pH 7.5。等量分装(例如，10 μ)，在干冰上对等分试样进行快速冷冻，并在-60℃或更低温度下最长储存18个月。仅解冻每个实验所需用量。不可冷冻。弃去解冻后剩余的全部溶液。

仅用于生命科学研究。不用于诊断操作。

100

expressed in Pichia pastoris

lyophilized

pkg of 2 × 10,000 U

Roche

wet ice

2-8℃

GHS08

Danger

H317 - H334

P261 - P280 - P284 - P304 + P340 - P333 + P313 - P342 + P311

Resp. Sens. 1 - Skin Sens. 1

11 - Combustible Solids

WGK 1