蛋白酶K，重组，PCR级

3.4.23.1 ( BRENDA | IUBMB )

重组酶与最初从白色念球菌(Tritirachium album)中分离出来的天然蛋白酶相同。重组酶的规格与天然蛋白酶的规格相同。氨基酸序列(分子量)和分子结构相同。但是，重组酶比天然酶的纯度更高，因为根据当前质量控制程序，重组酶不含DNA，因此它非常适用于分离PCR和RT-PCR模板。
蛋白酶K是枯草杆菌蛋白酶相关的丝氨酸蛋白酶,无明显的切割特异性。
该酶还具有冻干形式。

蛋白酶K能够切割氨基酸X和Y(X-_↓-Y)之间的蛋白质，其中X =脂族、芳族或疏水氨基酸，Y = 任何氨基酸。该酶对天然蛋白质非常有效，因此，可快速灭活内源核酸酶，如RNA酶和DNA酶。

• 选择一种有效的模板制备工具。可灭活大多数物种的DNA酶和RNA酶。
• 注重一致的质量和性能。严格的质量测试确保了最佳的稳定性和高水平的批次间性能一致性。
• 适用于各种条件下的样品制备。这款强大的酶可在很广的pH范围内保持稳定，是各种应用的理想选择。
• 受益于无污染的酶。该酶经过测试，不含RNA酶和DNA酶，并且几乎不含DNA。它特别适用于PCR模板的分离。

根据当前的质量控制程序，该制剂不含RNA酶、DNA酶和DNA。
不含核酸酶：每一批次均在各种底物上经过测试，确保不含核酸内切酶、核酸外切酶、核糖核酸酶和开口活性。
DNA含量：≤10pg/mg酶(由Threshold测定)
生物负载：≤5cfu/g(由《欧洲药典》中最严格的测试确定，该测试能确定活的需氧菌、酵母和真菌的总数)

体积活度：约50 U/ml溶液(chromozyme测定)；约600 U/ml溶液(血红蛋白测定)。一个酶活性单位是指在+25 ℃条件下在1分钟内切割18 mmol Chromozym TRY所需的酶量(相当于在血红蛋白测定中使用600 U/ml)。有关当前批次的具体值，参见分析证书。

激活剂：加入变性剂(SDS和尿素)，可刺激蛋白酶K的活性。例如，使用终浓度为2%的SDS可以显著提高蛋白酶K的活性。使用变性剂进行优化，可使蛋白酶活性提高七倍。

工作溶液：建议缓冲液：
蛋白酶K的最佳缓冲液取决于具体应用。应始终遵循参数部分中的pH和温度指南。一般来说，蛋白酶K在含有尿素、十二烷基硫酸钠(SDS)和胍盐等变性试剂的缓冲液中可保持稳定且活性非常高。

抑制剂：该酶可被Pefabloc^® SC灭活。但是，它不会被金属离子、螯合剂(如EDTA)、巯基试剂或胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶抑制剂灭活。

用于快速灭活RNA酶和DNA酶。
当过量使用且长时间孵育时，该酶可将蛋白质分解成游离氨基酸。
仅用于生命科学研究。不可用于诊断。

Pefabloc is a registered trademark of Pentapharm

100

expressed in Pichia pastoris

buffered aqueous solution (18 ± mg/mL; pH 7.5)

~2.5 units/mg protein (Approximately 2.5 U/mg (Chromozym assay); ≥30 U/mg hemoglobin assay. Refer to the Certificate of Analysis for specific values for the present lot.)

pkg of 1.25 mL (03115887001)
pkg of 25 mL (03115844001)
pkg of 5 mL (03115828001)

Roche

6.5 and 9.5

4.0 - 12.5

wet ice

2-8℃

GHS08

Danger

H317 - H334

P261 - P280 - P284 - P304 + P340 - P333 + P313 - P342 + P311

Resp. Sens. 1 - Skin Sens. 1

12 - Non Combustible Liquids

WGK 1