超滤离心管是一种利用离心力驱动中小体积溶液通过超滤膜,进行快速浓缩、渗滤和缓冲液置换的装置。 它由盖子、过滤装置和离心管组成。当离心力驱动溶液在滤膜表面流动时,盐分、引物、EDTA、污染物等小分子量溶质及溶剂在离心力作用下穿透滤膜滤出,而蛋白质、核酸、外泌体及细微粒子等目标组分则被截留下来并被收集,实现样品中不同组分分离的。由于超滤离心管可重复性好,样品回收率高;所需工作条件温和可控,有利于保持生物组分的生理活性。因此,超滤离心管处理法在蛋白样品脱盐、浓缩和缓冲液更换,高品质核酸模板的制备等实验环节得到广泛应用。
超滤离心管由超滤膜过滤器和离心管两部分组成。过滤器上部为圆柱型储液区。中部为扁平、呈V型过滤区,核心是双排垂直滤膜。下部为封闭的浓缩液收集槽。工作时,溶液沿着与滤膜表面平行方向(切向)流动,溶剂连同可滤除的小分子组分从滤膜渗出并被甩入离心管底成为滤出液。被滤膜截留的样品组分则随切向液流进入浓缩液槽。当目标分子明显小于滤膜孔径时,可使用超滤离心管对大分子污染物进行除热源、澄清和分离。目标样品会透过滤膜并保留在离心管内。反之,如果目标分子远大于膜孔径,则小分子污染物将被滤除,目标分子将集中在过滤装置中。
选择超滤离心管时需要考虑一下几点:
1、截留分子量
影响截留和产物回收率的因素有很多,如分子构象、带电特性、样品浓度、操作条件等。一般建议选择截留分子量(MWCO)比要浓缩的目标大分子的分子量小2-3倍的超滤膜。
2、管身材质
超滤离心管的管身材质通常为聚丙烯或聚乙烯。这两种材质具有较高的化学稳定性,可以适应大多数样品。
3、盖子材质
盖子的材质通常与管身的材质相同,也是聚丙烯或聚乙烯。
4、容量
超滤离心管的容量通常分为15ml、50ml、100ml、250ml等多种规格,根据实际需要选择合适的容量。